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液相色譜儀作為目前醫(yī)院的大型場(chǎng)所，所使用的分析儀器在使用過(guò)程經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題因此大家就有必要了解一下液相色譜儀常見(jiàn)問(wèn)題解決辦法因?yàn)橹挥羞@樣大家才可以在液相色譜儀出問(wèn)題的時(shí)候就解決它，所以大家有興趣的話可以一起來(lái)了解一下。

液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題解決辦法

可能的原因及解決方法(一)保留時(shí)間變化1.柱溫變化柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱

2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱

3.緩沖液容量不夠用》25mmol/L的緩沖液

4.柱污染每天沖洗柱

5.柱內(nèi)條件變化穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相

6.柱快達(dá)到壽命采用保護(hù)柱(二)保留時(shí)間縮短1.流速增加檢查泵,重新設(shè)定流速

2.樣品超載降低樣品量

3.鍵合相流失流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

4.流動(dòng)相組成變化防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀

5.溫度增加柱恒溫(三)保留時(shí)間延長(zhǎng)1.流速下降管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡

2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱

3.鍵合相流失同前(二)3

4.流動(dòng)相組成變化同前(二)4

5.溫度降低同前(二)5(四)出現(xiàn)肩峰或分*1.樣品體積過(guò)大用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%

2.樣品溶劑過(guò)強(qiáng)采用較弱的樣品溶劑

3.柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件

4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過(guò)濾器,過(guò)濾樣品

5.進(jìn)樣器損壞更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子(五)鬼峰1.進(jìn)樣閥殘余峰每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗

2.樣品中未知物處理樣品

3.柱未平衡重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑(尤其是離子對(duì)色譜)

4.三(TFA)氧化(肽譜)每天新配,用抗氧化劑

5.水污染(反相)通過(guò)變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級(jí)的水(六)基線噪聲1.氣泡(尖銳峰)流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

2.污染(隨機(jī)噪聲)清洗柱,凈化樣品,用HPLC級(jí)試劑

3.檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲更換氘燈

4.電干擾(偶然噪聲)采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來(lái)源(如水浴等)

5.檢測(cè)器中有氣泡流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

(七)峰拖尾1.柱超載降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相

2.峰干擾清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相

3.硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品

4.同前(四)4同前(四)4

5.同前(四)3 5.同前(四)3

6.死體積或柱外體積過(guò)大連接點(diǎn)降至zui低,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管(八)峰展寬1.進(jìn)樣體積過(guò)大同(四)1

2.在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散

3.數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)

4.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過(guò)大設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%

5.流動(dòng)相粘度過(guò)高增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相

6.檢測(cè)池體積過(guò)大用小體積池,卸下熱交換器

7.保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫

8.柱外體積過(guò)大將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至zui小

9.樣品過(guò)載進(jìn)小濃度小體積樣品親，滿意嗎

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