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液相色譜儀的品牌和類型很多，使用方法也各不相同。這主要取決于你是哪種類型的液相色譜儀。當(dāng)你購(gòu)買設(shè)備時(shí)，制造商的工程師將培訓(xùn)使用方法。液相色譜與結(jié)構(gòu)儀器相結(jié)合是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）在分析氨基甲酸酯類農(nóng)藥和多核芳香烴等方面引起了廣泛的關(guān)注。液相色譜-紅外光譜法也得到了迅速發(fā)展，如環(huán)境污染分析法測(cè)定水中的碳?xì)浠衔锖秃Ｋ械姆菗]發(fā)性碳?xì)浠衔?，這導(dǎo)致了環(huán)境污染分析的新發(fā)展。

液相色譜法的使用方法：

內(nèi)容：

1  開機(jī)

1.1  打開電腦。

1.2打開每個(gè)液相色譜模塊的電源。

1.3雙擊桌面儀器-聯(lián)機(jī)進(jìn)入在線界面。

1.4  排氣：

1.4.1手動(dòng)擰下泵上的沖洗閥（逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)約1圈）。

1.4.2右擊“泵”圖標(biāo)區(qū)，選擇“方法”；“選項(xiàng)，進(jìn)入泵編輯畫面，設(shè)定流量：5毫升/分鐘（一般為3-5毫升/分鐘），點(diǎn)擊“確定”。

1.4.3右擊“泵”圖標(biāo)，點(diǎn)擊“控制……”選項(xiàng)，選擇“上”，點(diǎn)擊“好”，系統(tǒng)開始沖洗，直到管道中沒有氣泡（從溶劑瓶到泵入口）。（通常5分鐘），開關(guān)通道繼續(xù)沖洗，直到所有通道都沒有氣泡使用。

1.4.4在泵圖標(biāo)上單擊鼠標(biāo)右鍵，然后單擊方法。選項(xiàng)，設(shè)定流量：0ml≤分鐘，手動(dòng)擰緊沖洗閥。

右擊泵圖標(biāo)，單擊“方法”。“選擇，根據(jù)方法要求選擇合適的流動(dòng)相比例，設(shè)定流速：1.0ml/min。

1.4.6同樣，右鍵單擊“柱溫控器”，“檢測(cè)器”圖標(biāo)，單擊“方法...”選項(xiàng)，根據(jù)方法要求設(shè)置溫度，波長(zhǎng)，點(diǎn)擊“控制”選項(xiàng)，“ ON“打開烤箱和探測(cè)器。

2  編輯方法

2.1點(diǎn)擊“方法”-“編輯完整方法”開始編輯完整方法。

2.2選擇“數(shù)據(jù)分析”以外的三項(xiàng)，并輸入下一個(gè)選項(xiàng)卡。

2.3方法信息：將方法信息添加到方法注釋(例如：這是用于測(cè)試！)。轉(zhuǎn)到下一個(gè)選項(xiàng)卡。

2.4泵參數(shù)設(shè)置：按“流量”輸入流量，如1.0ml/min，停止時(shí)間：如果10 min(停止時(shí)間僅為制作樣品所需的時(shí)間)，按要求選擇適當(dāng)比例的流動(dòng)相比。如果：水=75/25，A=水，B=75%。去下一個(gè)標(biāo)簽。

2.5自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置：選擇“針頭注射”----您可以輸入進(jìn)樣量和洗瓶位置進(jìn)入下一個(gè)選項(xiàng)卡。

2.6柱溫箱參數(shù)設(shè)置：輸入所需溫度在空白箱下面的“溫度”，如：40度。轉(zhuǎn)到下一個(gè)選項(xiàng)卡。

2.7紫外探測(cè)器參數(shù)的設(shè)定：在"波長(zhǎng)"以下的空白處輸入所需的探測(cè)波長(zhǎng)，如254納米。單擊“確定”。

2.8在“運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表”中，選擇“數(shù)據(jù)獲取”，然后單擊“確定”。

2.9從“方法”菜單中選擇“另存方法”。“輸入合法名稱，如Test，然后單擊OK。”

3  單次采集

3.1從“運(yùn)行控制”菜單中，選擇“樣品信息”選項(xiàng)，選擇相應(yīng)的路徑，在“數(shù)據(jù)文件”中選擇“前綴/計(jì)數(shù)器”，輸入樣品瓶的位置，然后單擊“確定”。

3.2基線穩(wěn)定約10分鐘后，從“運(yùn)行控制”菜單中選擇“運(yùn)行方式”。

4  多次數(shù)據(jù)采集

4.1根據(jù)步驟2編輯完整的方法。

4.2單擊“順序”-“順序表”，輸入“樣品瓶”、“樣品名稱”、“注射次數(shù)”，選擇適當(dāng)?shù)?ldquo;抽樣方法”

4.3“序列”-“序列參數(shù)”，用于選擇保存序列數(shù)據(jù)的路徑(序列自動(dòng)生成名為“序列名稱-時(shí)間”的文件夾以保存數(shù)據(jù))。通過(guò)選擇前綴/計(jì)數(shù)器來(lái)保存數(shù)據(jù)建議。

4.4從“序列”菜單中，選擇“將序列另存為...”，輸入序列名稱，例如“測(cè)試”，然后單擊“確定”。

4.5從“運(yùn)行控制”菜單中選擇“運(yùn)行順序”。

5數(shù)據(jù)分析(脫機(jī)使用)

5.1雙擊“Instrument-Offline(儀表-脫機(jī))”圖標(biāo)輸入的脫機(jī)屏幕。

5.2在“查看”菜單上，單擊“數(shù)據(jù)分析”進(jìn)入數(shù)據(jù)分析屏幕。

5.3從“文件”菜單中選擇“呼叫信號(hào)”，然后選擇您的數(shù)據(jù)文件名。單擊“確定”，將調(diào)用數(shù)據(jù)。 （如果預(yù)先建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，則應(yīng)首先打開濃度較低的標(biāo)準(zhǔn)圖。）

5.4頻譜優(yōu)化：從“圖形”菜單中選擇“信號(hào)選項(xiàng)”。從“范圍”和適當(dāng)?shù)臅r(shí)間范圍中選擇“全范圍”或“自動(dòng)范圍”，或選擇“自定義范圍”調(diào)整。重復(fù)，直到圖形的比例合適為止。單擊“確定”。

6  積分：

6.1從“積分”菜單中選擇“積分事件”選項(xiàng)，并選擇合適的“坡度靈敏度”、“峰值寬度”、“zui峰面積”和“zui峰高度”。單擊可自動(dòng)加載積分參數(shù)。

單擊左側(cè)的“&Radic；”圖標(biāo)以存儲(chǔ)方法中的積分參數(shù)并退出Integral事件。

6.3如果積分結(jié)果不令人滿意，則修改相應(yīng)的積分參數(shù)，直到它們滿足為止。

7  標(biāo)準(zhǔn)曲線

7.1單擊“校準(zhǔn)” - “校準(zhǔn)設(shè)置”，然后輸入“內(nèi)容單位”。

7.2單擊“更正”-“新建更正表單”，然后單擊“確定”。輸入“復(fù)合名稱”和“內(nèi)容”，單擊“確定”，并根據(jù)提示刪除其他組件。

7.3要完成單級(jí)修正，如果要增加修正等級(jí)，從“文件”菜單中選擇“呼叫信號(hào)”，選擇您的數(shù)據(jù)文件名（第二個(gè)樣本），點(diǎn)擊“校準(zhǔn)”-“添加等級(jí)”，單擊“確定”。輸入“內(nèi)容”并依次增加校正級(jí)別。

8  打印報(bào)告

8.1從“報(bào)告”菜單中選擇“設(shè)置報(bào)告”選項(xiàng)，在“定量結(jié)果”框中單擊“量化”右側(cè)的黑色三角形，選擇“外部標(biāo)準(zhǔn)方法，其他選項(xiàng)保持不變”，然后單擊“確定”。

8.2從“報(bào)表”菜單中選擇“打印報(bào)表”，將報(bào)表的結(jié)果打印到屏幕上，如果要導(dǎo)出到打印機(jī)，則單擊報(bào)表底部的“打印”按鈕。

8.3單擊“文件” - “另存為” - “方法”以保存數(shù)據(jù)分析方法?？梢灾苯釉?ldquo;文件” - “調(diào)用” - “方法”下調(diào)用下一個(gè)分析。 （調(diào)用的方法包括積分法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法和打印報(bào)告法）

9  關(guān)機(jī)

9.1停機(jī)前，關(guān)閉紫外線燈，用相應(yīng)的溶劑（甲醇或乙腈）沖洗系統(tǒng)約30分鐘。（色譜柱zui終應(yīng)儲(chǔ)存在甲醇或乙腈中）

9.2退出化學(xué)工作站，在提示時(shí)關(guān)閉泵和其他窗口，并關(guān)閉計(jì)算機(jī)。

9.3關(guān)閉每個(gè)模塊的1260電源開關(guān)。

10  其它注意事項(xiàng)

10.1當(dāng)樣品運(yùn)行時(shí)，不要在自動(dòng)復(fù)核前打開蓋子，否則取樣過(guò)程將停止。

10.2當(dāng)系統(tǒng)泄漏時(shí)，機(jī)器將檢測(cè)并停止注射，狀態(tài)指示燈將為紅色。檢查干燥并放置泄漏，干燥泄漏傳感器，單擊ON按鈕，系統(tǒng)重新初始化。

10.3注意紫外線燈的使用壽命。切勿來(lái)回切換紫外線燈。

液相色譜法只要求樣品可以制成溶液，而不受樣品的揮發(fā)性的限制。因此，可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性、解離和非解離物質(zhì)以及各種分子量范圍。在樣品預(yù)處理的同時(shí)，hplc實(shí)現(xiàn)了高分辨率和高靈敏度，從而可以分離并同時(shí)確定性質(zhì)非常相似的物質(zhì)，并能在復(fù)雜的相體中分離痕量成分。隨著固定相的發(fā)展，在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成液相色譜的分離是解決生化分析問(wèn)題的一種有希望的方法。由于液相色譜具有分辨率高、靈敏度高、速度快、色列可重復(fù)使用、流出部件容易收集等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)學(xué)研究、環(huán)境分析、以及無(wú)機(jī)分析。