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液相色譜儀的品牌和類型很多，使用方法也各不相同。這主要取決于你是哪種類型的液相色譜儀。當你購買設備時，制造商的工程師將培訓使用方法。液相色譜與結構儀器相結合是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜-質譜法（LC-MS）在分析氨基甲酸酯類農藥和多核芳香烴等方面引起了廣泛的關注。液相色譜-紅外光譜法也得到了迅速發(fā)展，如環(huán)境污染分析法測定水中的碳氫化合物和海水中的非揮發(fā)性碳氫化合物，這導致了環(huán)境污染分析的新發(fā)展。

液相色譜法的使用方法：

內容：

1  開機

1.1  打開電腦。

1.2打開每個液相色譜模塊的電源。

1.3雙擊桌面儀器-聯(lián)機進入在線界面。

1.4  排氣：

1.4.1手動擰下泵上的沖洗閥（逆時針旋轉約1圈）。

1.4.2右擊“泵”圖標區(qū)，選擇“方法”；“選項，進入泵編輯畫面，設定流量：5毫升/分鐘（一般為3-5毫升/分鐘），點擊“確定”。

1.4.3右擊“泵”圖標，點擊“控制……”選項，選擇“上”，點擊“好”，系統(tǒng)開始沖洗，直到管道中沒有氣泡（從溶劑瓶到泵入口）。（通常5分鐘），開關通道繼續(xù)沖洗，直到所有通道都沒有氣泡使用。

1.4.4在泵圖標上單擊鼠標右鍵，然后單擊方法。選項，設定流量：0ml≤分鐘，手動擰緊沖洗閥。

右擊泵圖標，單擊“方法”。“選擇，根據方法要求選擇合適的流動相比例，設定流速：1.0ml/min。

1.4.6同樣，右鍵單擊“柱溫控器”，“檢測器”圖標，單擊“方法...”選項，根據方法要求設置溫度，波長，點擊“控制”選項，“ ON“打開烤箱和探測器。

2  編輯方法

2.1點擊“方法”-“編輯完整方法”開始編輯完整方法。

2.2選擇“數據分析”以外的三項，并輸入下一個選項卡。

2.3方法信息：將方法信息添加到方法注釋(例如：這是用于測試！)。轉到下一個選項卡。

2.4泵參數設置：按“流量”輸入流量，如1.0ml/min，停止時間：如果10 min(停止時間僅為制作樣品所需的時間)，按要求選擇適當比例的流動相比。如果：水=75/25，A=水，B=75%。去下一個標簽。

2.5自動進樣器參數設置：選擇“針頭注射”----您可以輸入進樣量和洗瓶位置進入下一個選項卡。

2.6柱溫箱參數設置：輸入所需溫度在空白箱下面的“溫度”，如：40度。轉到下一個選項卡。

2.7紫外探測器參數的設定：在"波長"以下的空白處輸入所需的探測波長，如254納米。單擊“確定”。

2.8在“運行時選項表”中，選擇“數據獲取”，然后單擊“確定”。

2.9從“方法”菜單中選擇“另存方法”。“輸入合法名稱，如Test，然后單擊OK。”

3  單次采集

3.1從“運行控制”菜單中，選擇“樣品信息”選項，選擇相應的路徑，在“數據文件”中選擇“前綴/計數器”，輸入樣品瓶的位置，然后單擊“確定”。

3.2基線穩(wěn)定約10分鐘后，從“運行控制”菜單中選擇“運行方式”。

4  多次數據采集

4.1根據步驟2編輯完整的方法。

4.2單擊“順序”-“順序表”，輸入“樣品瓶”、“樣品名稱”、“注射次數”，選擇適當的“抽樣方法”

4.3“序列”-“序列參數”，用于選擇保存序列數據的路徑(序列自動生成名為“序列名稱-時間”的文件夾以保存數據)。通過選擇前綴/計數器來保存數據建議。

4.4從“序列”菜單中，選擇“將序列另存為...”，輸入序列名稱，例如“測試”，然后單擊“確定”。

4.5從“運行控制”菜單中選擇“運行順序”。

5數據分析(脫機使用)

5.1雙擊“Instrument-Offline(儀表-脫機)”圖標輸入的脫機屏幕。

5.2在“查看”菜單上，單擊“數據分析”進入數據分析屏幕。

5.3從“文件”菜單中選擇“呼叫信號”，然后選擇您的數據文件名。單擊“確定”，將調用數據。 （如果預先建立標準曲線，則應首先打開濃度較低的標準圖。）

5.4頻譜優(yōu)化：從“圖形”菜單中選擇“信號選項”。從“范圍”和適當的時間范圍中選擇“全范圍”或“自動范圍”，或選擇“自定義范圍”調整。重復，直到圖形的比例合適為止。單擊“確定”。

6  積分：

6.1從“積分”菜單中選擇“積分事件”選項，并選擇合適的“坡度靈敏度”、“峰值寬度”、“zui峰面積”和“zui峰高度”。單擊可自動加載積分參數。

單擊左側的“&Radic；”圖標以存儲方法中的積分參數并退出Integral事件。

6.3如果積分結果不令人滿意，則修改相應的積分參數，直到它們滿足為止。

7  標準曲線

7.1單擊“校準” - “校準設置”，然后輸入“內容單位”。

7.2單擊“更正”-“新建更正表單”，然后單擊“確定”。輸入“復合名稱”和“內容”，單擊“確定”，并根據提示刪除其他組件。

7.3要完成單級修正，如果要增加修正等級，從“文件”菜單中選擇“呼叫信號”，選擇您的數據文件名（第二個樣本），點擊“校準”-“添加等級”，單擊“確定”。輸入“內容”并依次增加校正級別。

8  打印報告

8.1從“報告”菜單中選擇“設置報告”選項，在“定量結果”框中單擊“量化”右側的黑色三角形，選擇“外部標準方法，其他選項保持不變”，然后單擊“確定”。

8.2從“報表”菜單中選擇“打印報表”，將報表的結果打印到屏幕上，如果要導出到打印機，則單擊報表底部的“打印”按鈕。

8.3單擊“文件” - “另存為” - “方法”以保存數據分析方法?？梢灾苯釉?ldquo;文件” - “調用” - “方法”下調用下一個分析。 （調用的方法包括積分法，標準曲線法和打印報告法）

9  關機

9.1停機前，關閉紫外線燈，用相應的溶劑（甲醇或乙腈）沖洗系統(tǒng)約30分鐘。（色譜柱zui終應儲存在甲醇或乙腈中）

9.2退出化學工作站，在提示時關閉泵和其他窗口，并關閉計算機。

9.3關閉每個模塊的1260電源開關。

10  其它注意事項

10.1當樣品運行時，不要在自動復核前打開蓋子，否則取樣過程將停止。

10.2當系統(tǒng)泄漏時，機器將檢測并停止注射，狀態(tài)指示燈將為紅色。檢查干燥并放置泄漏，干燥泄漏傳感器，單擊ON按鈕，系統(tǒng)重新初始化。

10.3注意紫外線燈的使用壽命。切勿來回切換紫外線燈。

液相色譜法只要求樣品可以制成溶液，而不受樣品的揮發(fā)性的限制。因此，可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性、解離和非解離物質以及各種分子量范圍。在樣品預處理的同時，hplc實現了高分辨率和高靈敏度，從而可以分離并同時確定性質非常相似的物質，并能在復雜的相體中分離痕量成分。隨著固定相的發(fā)展，在充分保持生化物質活性的條件下完成液相色譜的分離是解決生化分析問題的一種有希望的方法。由于液相色譜具有分辨率高、靈敏度高、速度快、色列可重復使用、流出部件容易收集等優(yōu)點，廣泛應用于生物化學、食品分析、醫(yī)學研究、環(huán)境分析、以及無機分析。